sábado, 18 de octubre de 2014


PRUEBA DE RUMPEL- LEEDE

También llamada prueba del lazo o torniquete, consiste en mantener elevada la presión en un miembro por un periodo de 5 minutos, con un lazo o el manguito inflable del Tensiómetro como para medir T. A. y comprimirlo con una presión menor que la sistólica pero mayor que la diastólica para producir estasis sanguínea en las vénulas  y capilares.
MATERIAL A ESTUDIAR; Observación de la piel luego de interrumpir circulación venosa. Se realiza el recuento de las petequias (pequeñas manchas hemorrágicas en un círculo de 5cm de diámetro) normalmente no se debe producir más de 5 petequias por debajo de la compresión, especialmente en la cara palmar del antebrazo próxima al manguito neumático. Más de diez petequias, y sobre todo extendidas más allá del cuarto superior del antebrazo es patológico.
Tiempo insumido al paciente: 5 a 10 minutos.

FINALIDAD: Determinar la fragilidad de las paredes capilares, estimar la tendencia a la hemorragia, Ayuda a reconocer la trombocitopenia.

Preparación previa: No es necesaria. No repetir en el mismo miembro antes de los 7 días.
RESULTADOS:

Valores normales: Ninguna petequia o hasta 10 petequias en un área de 5cm. Escala para informar el número de petequias:

0 a 10 = 1+
10 a 20 =2+
20 a 50 = 3+
50 o más petequias = 4+

Valores aumentados: Pueden indicar coagulación intravascular difusa, disminución del fibrinógeno, disminución de la protrombina, deficiencia del factor VII, trombocitopenia, enfermedad de Von Willebrand, deficiencia de vitamina K. Y puede estar asociado a afecciones no relacionadas con los trastornos de la coagulación como: escarlatina, diabetes, gripe, sarampión, escorbuto.

También es anormal la prueba en las trombopatías quizá debido a que por falla plaquetaria no hay vasoconstricción adecuada ni formación de trombo blanco.

Confiabilidad de los resultados. Buena.
Medicamentos que pueden alterar los resultados: Corticoesteroides.

RESULTADO:  1+


RETRACCIÓN DEL COÁGULO


INTRODUCCIÓN: Puesto que el coágulo de fibrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de glóbulos rojos establece el límite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coágulo se retrae tanto más cuanto menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al número de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coágulo se modifica en los trastornos de este tipo:  choque, quemaduras, etc.

Mide la cantidad de fibrina formada y su retracción así como el número de función de las plaquetas, pues poseen una proteína similar a la actomiosina, que produce la retracción del coágulo.


MATERIAL:

Tubos de ensaye para centrifuga
Alambre de 1mm de grosor
Baño María de 37ºC
Equipo de venopuncion.

TECNICA:
1.    Se pone en un tubo de centrifuga graduado de 5 ml. De sangre venosa recién obtenida. Se lava el alambre al fondo del tubo.
2.    Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37ºC en donde se deja 1hr. Después de la formación del coágulo sin tocarlo.
3.    Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurrir dentro del tubo el coágulo unido al alambre durante 1 a 2 min.
4.    Se lee el volumen del líquido que quedo en el tubo. El resultado se expresa como un porcentaje del volumen inicial de 5 ml.

Ejemplo: Si después de la coagulación 5 ml. De sangre suministraron 3ml. de líquido

La retracción es de: 3x100 =60 por ciento
        5

VALORES NORMALES
Entre 48 y 64 por ciento.

RESULTADOS OBTENIDOS:

La retracción es de: 2.5x100 = 50%
                                      5






TIEMPO DE SANGRADO

INTRODUCCIÓN:
Un tiempo de sangrado normal indica una retracción normal de los capilares; y la existencia de un número suficiente de plaquetas, con actividad normal.
La metamorfosis viscosa normal depende de un buen mecanismo extrínseco de producción de Tromboplastina, por lo tanto, el tiempo de sangrado se alarga en la insuficiencia del factor VII. El tiempo de sangrado aumenta en forma característica en la púrpura trombocitopénica.

METODOLOGÍA
Se utiliza el “Método de Duke”

MATERIAL:
Lanceta estéril
Torundas alcoholadas
Reloj cronómetro
Papel filtro

TÉCNICA:
1.    Con una lanceta estéril, se practica en el borde inferior del lóbulo de la oreja una punción de 3mm de profundidad. Se pone en marcha el cronómetro. El borde debe ser bastante profundo, y no debe de abarcar venas visibles.

2.     A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente sobre la gota de sangre el borde de un pequeño disco de papel filtro, cuidando de no tocar la piel. Esta maniobra por objeto es impedir que se forme un coágulo en la gota de sangre sobre la herida, pues los tiempos de sangrado resultarán anormalmente bajos.

3.    Utilizando una nueva zona de papel filtro para cada secado de medio minuto, puede tenerse un registro conveniente del tiempo total (tiempo en minutos = número de gotas divididas entre dos) Se toma como punto final al momento en el cual el papel filtro ya no absorbe sangre.

TIEMPO DE SANGRADO
De unos 3 minutos 8sin embargo, puede ser aveces hasta 5 minutos en sijetos normales)

MÉTODO DE IVY
TÉCNICA:
1.    Se coloca alrededor del brazo un manguito de esfindometro con el cual se ejerce una presión de 40mm de Hg que debe permaneces aquel durante toda la prueba.

2.    Utilizando una lanceta estéril se hace a intervalos cortos tres punciones (entre 2.5 y 3.0mm de profundidad) a lo largo de la cara flexora 8interna) el antebrazo, evitando las venas visibles. Se pone en marcha el cronómetro

3.    A intervalos de medio minuto, utilizando papel filtro se seca cuidadosamente cada gota de sangre en la misma forma que para el método de DUKE, el punto final es el mismo.
TIEMPO NORMAL DE SANGRADO EN EL MÉTODO DE IVY
Entre 2 y 6 minutos, máximo 7 minutos.


viernes, 10 de octubre de 2014

ROSA DE BENGALA
(Antígeno Brucelar Amortiguado)
Para el Diagnostico de Brucelosis


Prueba de aglutinación rápida en Placa para la detección temprana de aglutininas específicas de Brucella (Brucella melitensis, abortus y suis).

PRINCIPIO:
Se utiliza un antígeno de Brucella abortus biotipo1 (cepa 99s o cepa 1119-3) acidificado regulado y teñido con Rosa de Bengala aun pH de 3.65 +/- 0.05para la detección de aglutininas específicas de Brucella. Esta prueba puede ser utilizada para un diagnóstico temprano.
  
REACTIVOS:
Antígeno Rosa de Bengala
Control Positivo de Brucella
Control Negativo de Brucella

MATERIAL:
1.    Placa de prueba de vidrio.
2.    Pipetas desechables.
3.    Gotero para en antígeno de 30-40µL.
4.    Aplicador de madera.
5.    Cronómetro.

MUESTRA:
Se recomienda que únicamente se utilice suero.
Evite la hemolisis o lipemia de las muestras ya que esto puede inferir con los resultados. Conservar la muestra de 2-8 ºC si no se realiza el estudio en el momento.

PROCEDIMIENTO:
1.    Llevar a temperatura ambiente el reactivo, controles y muestra de suero.
2.    Utilizando la pipeta colocar una gota de la muestra del paciente en un círculo de la placa.
3.    Mezclar suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre totalmente homogéneo, después coloque 30 µL en la placa de prueba, en el mismo círculo donde se colocó la muestra del paciente, mezcle ambas con un aplicador.
4.    Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.
5.    Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante: Después de este tiempo la lectura ya no es válida.

RESULTADOS:
·         No aglutinación - Suero Negativo.



viernes, 3 de octubre de 2014

VDRL- URS
INTRODUCCION


La Sífilis es una enfermedad generalizada, producida por Treponema pallidum, transmitida habitualmente por contacto sexual.
El diagnostico descansa en la serología; los métodos determinan dos clases de anticuerpos: 1) Tipo “cardiolipina”, no treponema e inespecíficos y 2) Los antitreponemas específicos. La facilidad para su determinación ha hecho que los del tipo cardiolipina se utilicen universalmente en las exploraciones iniciales ya sean exámenes individuales o encuestas de población; la variante técnica más comúnmente empleada es la llamada VDRL ( Veneral Disease Reseach Laboratory) que determina la floculación en placa (cuantitativa) del antígeno con cardiolipina y lecitina.


REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADO:

- Antígeno en suspensión estabilizador (VDRL)
- Control Positivo
- Control Negativo
- Aguja No. 21 sin bisel
- Pipetas desechables (únicamente para presentaciones de 100 pruebas)


ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO

El antígeno de VDRL y los Sueros Controles son estables hasta su fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacena de 2 a 8°C. No congelar.



MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO
- Placa cóncava (Indispensable)
- Agitador Mecánico
- Cronometro
- Microscópico

OBTENCION DE LA MUESTRA
1.- Obtener 3.0 mL. de sangre por punción venosa.
2.- Centrifugar y separar el suero.


METODO CUALITATIVO
1.- En un anillo de una placa cóncava deposite 0.05 mL de suero problema.
2.- En anillos diferentes colocar una gota de suero control positivo y en otra por separado una gota de control negativo, extender sobre la superficie del anillo.
3.- Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizado previamente resuspendido, en cada una de las muestras utilizando la aguja No. 21 sin bisel.
4.- Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm DURANTE 4 MINUTOS. Las pruebas realizadas en un clima extremadamente seco puede provocar la evaporación de las muestras, por lo tanto, la placa en rotación puede ser cubierta con una tapa de caja Petri humedecida previamente con una gasa.
5- Leer inmediatamente al microscopio con Objetivo y Ocular 10 X.


INTERPRETACION
Control Positivo: Presencia de floculación mediana o grande.
Control Negativo: Ausencia de floculación.



RESULTADOS

1-    MUESTRA 1:   POSITIVO
2-    
EVIDENCIAS





martes, 16 de septiembre de 2014

MÉTODO DE TUBO DE ENSAYE
TÉCNICA: Previa asepcia, practicar venopunció y recoger 1ml de sangre.
Depositar en un tubo de ensaye, 1 gota de sangre y 4.9 ml de solución isotónica de NaCl al 0.9% para formar una suspención de eritrocitos al 2%.
Marcar 3 tubos de ensaye con las letra A, para el suero anti A, en el tubo B para el suero anti B y el tubo Rh, para una gota del suero anti D.
Añadir a cada tubo una gota de la suspención preparada con anterioridad de eritocitos al 2%
Centrifugar a 1000 rpm durante 1minuto.
Sacar los tubos y observar si existe aglutinación.

RESULTADO:

Grupo: A                       Rh: +

CONCLUSIÓN
Dependiendo el antigeno que tenga la persona en la sangre será la reacción del suero, podriamos decir que el suero es un descomponente o aglutinador para los factores sanguineos y poder identificar que Ag esta presente en la sangre.


sábado, 13 de septiembre de 2014

Recuento de plaquetas

Objetivo:
Que el alumno aprenda a contar correctamente las plaquetas

Introducción:
Las plaquetas son los elementos formes más pequeños de la sangre, actúan en la hemostasia y en el mantenimiento de la integridad vascular, además de participar en el proceso de la coagulación sanguínea.
Las plaquetas son difíciles de contar debido que son pequeñas y deben distinguirse de los restos celulares. Otra fuente de dificultad reside en su tendencia de adherirse al cristal, a cualquier cuerpo extraño y en particular unas de otras.
Para el conteo de plaquetas se utiliza oxalato de amonio como diluyente y se cuenta en los mismos cuadros para glóbulos rojos y el resultado se multiplica por 1000.

Materiales y reactivos:
 .-Pipeta de thoma para glóbulos blancos
.-Microscopio
.-Cámara de Neubauer
.-Caja de petri con papel filtro
.-Oxalato de amonio al 1%
.-Sangre venosa con EDTA

Procedimiento:
1.    Mezclar la sangre perfectamente.
2.    Aspirar la muestra hasta la marca 0.5.



3.    Limpiar con gasa el exceso de sangre y aspirar oxalato de amonio hasta la marca 11.


4.    Mezclar de 3 a 5 min, desechar las 3 primeras gotas y llenar las cuadriculas de la cámara de Neubauer.


5.    Dejar sedimentar de 10 a 15 min. La cámara en una caja petri con un disco de papel filtro húmedo en el fondo para evitar la evaporación.


6.    Enfocar la cámara y contar las plaquetas en los mismos cuadros para glóbulos rojos empleando el objetivo 40X.


7.    Las plaquetas contadas se multiplican por 1000 para obtener el número de plaquetas por mm.
Valor de referencia:
150 000 - 450 000 / mm3

Resultados:
Paciente: 280 000/ mm3


sábado, 6 de septiembre de 2014

 CUENTA DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS


INTRODUCCIÓN
El recuento diferencial de leucocitos consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido de sangre.
Al conocer la proporción de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo, cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyético podría verse reflejado en el cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.
Hay varios métodos de recuento diferencial de leucocitos, pero el más utilizado es el de almena y en línea.



MATERIAL

1.    Frotis sanguíneo teñido
2.    Microscopio
3.    Aceite de inmersión
4.    Un contador de células

PROCEDIMIENTO

1.    Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
2.    Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100
3.    Si el recuento se hace en línea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en línea paralela hasta contar 100 leucocitos
4.    Se va contando los mononucleares (monósitos, linfocitos) y los polimorfo nucleares (neutrófilos, eosinófilos y basófilos)  según su morfología
5.    Se reportan en % (valor relativo) o en valor absoluto (mm3)

RESULTADO:

Linfocitos: 51%
Monocitos: 3%
Eosinófilos: 4%
Basófilos: 1 %
Neutrófilos: 38%

Bandas: 3%